В патогенезе хронического эндометрита (ХЭ) важная роль принадлежит оксидативным нарушениям [1]. Хроническое воспалительное поражение эндометрия характеризуется перепроизводством свободных радикалов кислорода, метаболитов азота, продуктов гипохлорной кислоты [2], снижающих ресурсы клеточных мембран за счет активации процессов перекисного окисления липидов (ПОЛ), усиливающих системный и локальный воспалительный процесс на уровне эндометрия [3].

ПОЛ характеризуется образованием токсичных продуктов: малонового диальдегида, который изменяет проницаемость клеточных мембран, и 4-гидроксиноненовой кислоты, которая нарушает клеточный сигналинг, снижая активность белков-рецепторов, и усиливает апоптоз [4].

Защитным механизмом является система антиоксидантной защиты (АОЗ), в состав которой входят белки системы супероксиддисмутаз, каталаза и ряд других ферментов АОЗ, активирующих сигнальный путь Nrf2/KEAP1 [5].

Nrf2/Keap1 – это ключевой механизм защиты клеток от окислительной активности свободных радикалов, состоящий из двух механизмов. Первый механизм – Nuclear factor erythroid 2-related factor 2 (Nrf2), который, будучи фактором транскрипции, регулирует экспрессию генов, принимающих участие в процессах детоксикации и АОЗ. Второй механизм – Kelch-like ECH-associated protein 1 (Keap1). Keap1 – это ингибитор Nrf2, при связывании с которым Keap1 способствует деградации последнего [6].

Цель исследования – изучение факторов прооксидантного статуса и некоторых ферментов антиоксидантной защиты в периферической крови женщин с ХЭ.

Материал и методы

Изучены факторы ПОЛ и АОЗ у 100 женщин, рандомизированных по наличию или отсутствию верифицированного ХЭ на 2 группы. В 1-ю группу вошли 50 женщин с гистологически и иммуногистохимически подтвержденным ХЭ. Во 2-ю группу вошли 50 женщин без соматических заболеваний, сопоставимых по возрасту, отсутствию вредных привычек, режиму питания, количеству потребляемых в сутки калорий, двигательной активности. Исследование проведено в соответствии с решением Комитета по этике Медицинского института ФГАОУ ВО РУДН им. Патриса Лумумбы (протокол № 2 от 25 ноября 2021 г.).

Критерии включения в исследование: подписание информированного согласия и возможность выполнять назначенные исследования, наличие лабораторно верифицированного методом иммуногистохимического анализа ХЭ (код по Международной классификации болезней 10-го пересмотра № 71.1), хроническая воспалительная гипоплазия эндометрия при толщине эндометрия 6,29±1,22 мм., присутствие фиброзных включений в эндометрии в период предполагаемого «окна имплантации».

Критерии исключения: возраст < 18 лет и > 40,95±4,62 года, онкологические заболевания, соматические болезни в стадии декомпенсации, обострение хронического заболевания, любые оперативные вмешательства за период проведения исследования, выявление у больных онкологических заболеваний любой локализации в период проведения исследования.

Критерии невключения: женщины старше 45 лет, находящиеся в процессе антибиотико-, химио-, гормоно- или иммунотерапии, имеющие эндокринные нарушения, острую бактериальную или вирусную инфекцию, отсутствие ремиссии хронической инфекции органов женской репродуктивной системы или хронического заболевания, обострение аллергического заболевания, отсутствие понимания сути исследования.

Материалами для исследования была плазма крови и гемолизат эритроцитов из периферической крови. Забор периферической крови проводили путем пункции локтевой вены в утренние часы, с 10-часовым периодом голодания, в I фазу менструального цикла. Вещества, имеющие двойные связи, диеновые конъюгаты, кетодиены и сопряженные триены, основания Шиффа определяли в соответствии с указаниями И. А. Волчегорского в гептановом и изопропанольном экстрактах эритро­цитов периферической крови методом спектрофотометрии, концентрацию выражали в мкмоль/л.

Для подсчета результатов исследования использованы стандартные методы вариационной статистики. Для проверки количественных показателей на нормальность распределения исследовали в соответствии с критерием Колмогорова-Смирнова; при отсутствии данных за нормальное распределение использовали непараметрический критерий Манна-Уитни. При уровне значимости р < 0,05 различия между 1-й и 2-й группой были приняты как достоверные.

Результаты и обсуждение

Выявлены достоверные различия по содержанию первичных, вторичных и третичных продуктов ПОЛ (р< 0,05) в гептановой фракции липидного экстракта эритроцитов периферической крови (табл. 1).

В гептановой фракции могут быть обнаружены продукты переокисления ацильных остатков липидов, например жиров, холестериновых эфиров, свободных жирных кислот. У пациенток 1-й группы количество диеновых конъюгатов было достоверно снижено по отношению к показателям пациенток 2-й группы (р1-2=0,038; р< 0,05).

Снижение концентрации и интенсивности продуктов ПОЛ на первом этапе липопероксидации за счет уменьшения содержания диеновых конъюгатов способствует процессу накопления недоокисленных продуктов ПОЛ, характерных для хронического воспаления [7]. Чем опасно такое состояние?

Данный этап альтерации связан с функционированием реакций врожденного иммунитета, в частности активности и интенсивности фагоцитирующих клеток, а также их функционального резерва. Усиление фагоцитарной активности сопровождается активацией фермента НАДФ⋅Н-оксидазы и ферментного пути – гексозомонофосфатный шунт с формированием свободного молекулярного кислорода [8]. Содержание кетодиенов и сопряженных триенов оказалось выше, чем во 2-й группе (р1-2=0,054; р< 0,05), основания Шиффа также были незначительно увеличены относительно 2-й группы (р1-2=0,001; р< 0,05).

Выявлены достоверные различия по содержанию первичных, вторичных и третичных продуктов ПОЛ (р< 0,05) в изопропанольной фракции липидного экстракта эритроцитов периферической крови (табл. 2).

У женщин с ХЭ выявлено увеличение продуктов ПОЛ в периферической крови, что является признаком патогенетических процессов, происходящих на клеточных мембранах эритроцитов периферической крови. Поскольку в системе ПОЛ-АОЗ важное значение отводится ферментам АОЗ, исследование поясняет их роль в патогенезе ХЭ. Активность ферментов АОЗ (каталазы и супероксиддисмутазы) установлена спектрофотометрическим методом (табл. 3).

Результаты исследования свидетельствуют о снижении активности антиоксидантных ферментов у женщин с ХЭ на фоне повышения активности процессов липопероксидации, что связано с затратами ферментов АОЗ на нейтрализацию активных форм кислорода, избыточное количество которых регистрируется при воспалительном процессе.

Заключение

Результаты исследований свидетельствуют об усилении активности процессов свободнорадикального окисления клеточных мембран при снижении активности ферментов АОЗ у женщин с ХЭ.

СВЕДЕНИЯ ОБ АВТОРАХ

Сорокин Юрий Александрович (Yury А. Sorokin) – руководитель Центра репродуктивного здоровья КДЦ «МЕДСИ» на Солянке, Акционерное общество «Группа компаний «МЕДСИ», 123056, г. Москва, Российская Федерация
E-mail: Sorokin.YuA@medsigroup.ru
https://orcid.org/ 0000-0001-9305-323х

Гизингер Оксана Анатольевна (Oksana А. Gizinger) – доктор биологических наук, профессор, профессор кафедры микробиологии им. В. С. Киктенко, Медицинский институт, Федеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего образования «Российский университет дружбы народов имени Патриса Лумумбы», 117198, г. Москва, Российская Федерация
E-mail: OGizinger@gmail.com
https://orcid.org/0000-0001-9302-0155

Литература

1. Адамян Л. В., Пивазян Л. Г., Курбатова К. С., Маилова К. С., Степанян А. А. Оксидативный стресс, ферроптоз, соматические мутации, антиоксидантная терапия и эндометриоз: новый взгляд на проблему // Проблемы репродукции. 2024. Т. 30, № 6. С. 32–44
2. Гизингер О. А., Сорокин Ю. А., Радзинский В. Е. Хронический эндометрит. Местные прооксидантные, антиоксидантные и иммунометаболические нарушения // Гинекология. 2024. Т. 26, № 2. С. 165–170. DOI: https://doi.org/10.26442/20795696.2024.2.202800
3. Kitaya K., Ishikawa T. Chronic endometritis: simple can be harder than complex? // Fertil. Steril. 2021. Vol. 115, № 6. P. 1443–1444. DOI: https://doi.org/10.1016/j.fertnstert.2021.03.023
4. Егорова А. И., Крутова В. А., Завгородняя А. Г. Оценка нарушений окислительного метаболизма у женщин с хроническими воспалительными заболеваниями органов малого таза // Кубанский научный медицинский вестник. 2018. Т. 25, № 6. С. 68–72. DOI: https://doi.org/10.25207/1608-6228-2018-25-6-68-72
5. Данусевич И. Н., Курашова Н. А., Наделяева Я. Г., Гейн А. А. Активность процессов перекисного окисления липидов у женщин с репродуктивными нарушениями и хроническим эндометритом // Acta Biomedica Scientifica. 2016. Т. 1, № 3 (2). С. 16–19. DOI: https://doi.org/10.12737/article_590823a410c5d8.60967625
6. Зенков Н. К., Меньщикова Е. Б. Окислительный стресс при воспалении // Успехи современной биологии. 1997. Т. 117, вып. 2. С. 155–171
7. Колесникова Л. И., Гребенкина Л. А., Даренская М. А., Власов Б. Я. Окислительный стресс как неспецифическое патогенетическое звено репродуктивных нарушений (обзор) // Бюллетень СО РАМН. 2012. Т. 32, № 1. С. 58–66
8. Меньщикова Е. Б., Зенков Н. К., Ланкин В. З., Бондарь И. А., Труфакин В. А. Окислительный стресс: патологические состояния и заболевания. Новосибирск: АРТА, 2008. 284 с.